O Kit de RT-qPCR da gripe A/B e RSV é uma transcriptase reversa (RT) em tempo real
teste de reação em cadeia da polimerase (PCR) destinado à detecção qualitativa da gripe
vírus A e B e vírus sincítico respiratório (VSR) em esfregaço nasofaringeal (NP),
colchões de esfregaço e escarro da boca-faringe (OP) colhidos por um profissional de saúde, a partir de
doentes suspeitos de doença do trato respiratório por parte do profissional de saúde.
Resultados positivos indicam a presença de vírus da gripe e RNA do RSV; correlação clínica
O diagnóstico é necessário para determinar se o
Os resultados positivos não descartam infecção bacteriana ou co-infecção com outras bactérias.
Os resultados negativos não excluem a infecção pelo vírus da gripe e pelo RSV e não devem ser
Os resultados negativos devem ser
Os resultados do ensaio foram combinados com observações clínicas, histórico do doente e informações epidemiológicas.
O kit de RT-qPCR da gripe A/B e RSV destina- se a ser utilizado por pessoas qualificadas e treinadas.
O pessoal de laboratório que seja competente na realização de análises RT-PCR em tempo real.
Apenas para utilização profissional de diagnóstico in vitro.
RESUMO
A gripe é um tipo de doença respiratória infecciosa altamente aguda causada pela infecção de
vírus da gripe, pode aparecer de repente e espalhar- se rapidamente num curto prazo, resultando em
A taxa de mortalidade é relativamente baixa, com uma taxa de incidência elevada e uma certa taxa de mortalidade.
Os sintomas causados pelos vírus da gripe A e B são similares.
Outros sintomas incluem calafrios, dor de cabeça, dor muscular,
fadiga, congestão nasal e secreção nasal, etc. A gripe A apresenta a variação antigénica mais forte,
A gripe B tem uma variabilidade relativamente fraca, geralmente
causa doenças leves, ataca principalmente crianças e pode causar surtos locais.
O vírus respiratório sincicial pertence ao género pneumovírus da família
É causador principalmente do trato respiratório inferior.
infecções tais como bronquiose e pneumonia em lactentes com menos de 6 meses e
infecções respiratórias em crianças mais velhas e adultos.
A doença é altamente infecciosa e não existem actualmente medicamentos e vacinas específicos.
Princípio
O Kit de RT-qPCR da gripe A/B e RSV é um Taqman baseado em sonda fluorescente múltipla
A sonda fluorescente Taqman é um oligonucleótido específico
Para cada sonda, a extremidade 5 ′ é rotulada com um
Quando a sonda está intacta, o fluoro é colocado na parte inferior do tubo, enquanto que a extremidade 3 ′ é rotulada com um extintor.
A fluorescência emitida pelo fluoróforo é absorvida pelo extintor e não é fluorescente
No entanto, durante a amplificação do modelo, a sonda será degradada devido a
para a atividade da exonuclease 5'-3' da Taq DNA polimerase, e o relator fluorescente e
O sistema de detecção de radiação é utilizado para a detecção de sinais fluorescentes, quando o extintor é dividido e separado.
a geração de cada amplicão molecular é acompanhada pela geração de um fluorescente
O monitoramento em tempo real de todo o processo de PCR pode ser avaliado através do monitoramento do
acumulação de sinais fluorescentes.
Este produto permite a detecção quadrupla num único tubo, incluindo três tubos independentes.
O vírus é transmitido através de genes do vírus e de um controlo interno dirigido ao gene da RNAse P humana (RNP) para o vírus.
A avaliação da qualidade das amostras foi efectuada através de sondas e primers específicos para a detecção de
região conservada do vírus da gripe A e B e do RSV. Controle interno (gene RNase P)
fornece um controlo procedimental de extracção de ácidos nucleicos e um controlo negativo secundário.
O controlo positivo fornece uma extracção de ácido nucleico e um controlo de transcrição inversa
para validar o procedimento global e a integridade do reagente.
AVISO E PRECAUÇÕES
1. Por favor, leia atentamente esta instrução de utilização antes de iniciar a experiência, e
Siga estritamente as instruções.
2Este medicamento só deve ser utilizado por pessoal de laboratório treinado em locais protegidos contra riscos.
laboratórios e usar dispositivos de protecção adequados.
3Este produto deve ser protegido da luz.
Tubos e pontas livres de RNase durante a detecção.
4A extracção do ácido nucleico deve ser efectuada o mais rapidamente possível após a amostragem.
recolha para evitar a degradação dos ácidos nucleicos virais; se não puder ser efectuada logo que
Se possível, deve ser armazenado de acordo com a recolha adequada de amostras e
Orientações de armazenagem.
5Uma vez que este teste envolve a extracção de RNA viral e amplificação por PCR, deve ser tomada precaução.
A medição deve ser efectuada regularmente para evitar a contaminação da mistura de reacção de amplificação do kit.
Recomenda- se a monitorização da contaminação laboratorial.
6. Manusear todos os reagentes, controlos e amostras de acordo com as boas práticas de laboratório
Para evitar a transferência de amostras ou de controlos.
7Eliminar todos os materiais que tenham entrado em contacto com amostras e reagentes em
de acordo com os regulamentos nacionais, estaduais e locais.
8Limpe e desinfecte cuidadosamente todas as superfícies de trabalho de laboratório com um
solução com 70% de álcool etílico ou agentes de descontaminação de ADN/RNase.
