Detecção ácida nucleica do coronavirus novo

A detecção ácida nucleica tem as características do diagnóstico adiantado, da sensibilidade alta e da especificidade, e é a “bandeira de ouro” para diagnosticar a pneumonia coronária nova. Atualmente, a tecnologia quantitativa fluorescente do tempo real o mais amplamente utilizado RT-PCR. Geralmente, os dois alvos situados nos genes de ORF1ab e de N do vírus são detectados. O mesmo espécime deve encontrar o positivo dobro do alvo ou o teste repetido como o único positivo do alvo, ou os dois espécimes devem encontrar o único alvo ao mesmo tempo para confirmar o positivo do ácido nucleico do vírus SARS-CoV-2.

1. Princípio de jogo ácido nucleico da detecção? A sequência original do gene do vírus é usada como o alvo da detecção. Com a amplificação do PCR, a sequência do ADN do alvo nós escolhemos aumentos exponencialmente. Cada sequência amplificada do ADN pode ser combinada com uma ponta de prova fluorescente-etiquetada que nós adicionemos adiantado. , Sinal fluorescente do produto, mais genes amplificados, mais forte do alvo o sinal fluorescente acumulado. Nas amostras sem vírus, desde que não há nenhuma amplificação do gene do alvo, nenhum aumento no sinal da fluorescência pode ser detectado. Consequentemente, a detecção ácida nucleica é realmente determinar se há ácido nucleico viral na amostra detectando a acumulação de sinais fluorescentes.

2. Que são os tipos de teste ácido nucleico amostras?

Geralmente, os cotonetes nasais, cotonetes da garganta, cotonetes nasopharyngeal, escarro, brônquico lavam fluido, alveolar lavam o líquido e assim por diante.

3. a detecção da Cinco-etapa o procedimento novo da detecção do coronavirus exige cinco etapas: amostra, retenção da amostra, armazenamento, extração ácida nucleica, e testes do computador. Isto exige experiências científicas rigorosas terminar.

1. Limpe a parede traseira do cotonete pharyngeal e das amídalas pharyngeal bilaterais 5-10 vezes cada um com um cotonete pharyngeal, e mantenha-a girar o cotonete;

2. Os pessoais médicos são exigidos manter a amostra, e a cabeça do cotonete é imergida na solução da preservação da pilha, e a cauda é quebrada. Aperte o tampão do tubo imediatamente;

3. Salvar, põe o tubo da amostra em um saco selado e para enviá-lo a tempo para a inspeção, e o processo da inspeção exige um ambiente restrito do transporte, armazenado em 2-8 graus Célsio.

4. Opere a extração ácida nucleica, extraia o ácido nucleico da amostra neutralizada do vírus para a detecção subsequente, e use o equipamento automatizado, tal como um extrator ácido nucleico.

5. Detecção ácida nucleica do PCR da fluorescência, isto é, detecção da máquina, toma 70-80 minutos para que o extrato submeta-se à reação fluorescente da amplificação do PCR.

4. Que são os problemas com detecção ácida nucleica?

O falso negativo, devido à amostra imprópria, ao armazenamento impróprio do espécime, ao uso de tipos diferentes de espécimes, e ao uso dos reagentes dos fabricantes diferentes pode causar os resultados da análise ácidos nucleicos ser “falso negativo” e diagnóstico faltado;

As exigências altas para o equipamento ou as plataformas da detecção, instrumentos altos da sensibilidade RT-PCR são caras, e exigem a limpeza alta e os operadores do laboratório;

Os testes ácidos nucleicos tomam uns muitos tempos, e tomam geralmente 4-6 horas para terminar um teste de RT-PCR. Contudo, considerando o transporte da amostra, no caso de uma grande reserva das amostras, os resultados podem geralmente ser relatados assim que 24 horas. Consequentemente, quando o teste ácido nucleico é negativo, a adição detecção do anticorpo de IgM e de IgG pode compensar pelos defeitos que o teste ácido nucleico é provável causar a diagnóstico faltado.